發(fā)布時(shí)間: 2021-08-20 點(diǎn)擊次數(shù): 1133次
近年來(lái),隨著分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展,基于核酸檢測(cè)的診斷方法已大量建立并廣泛應(yīng)用于人類疾病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)中,
TwistDx恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)便是其中一種,與其他的核酸擴(kuò)增技術(shù)相比,恒溫?cái)U(kuò)增有快速、高效、特異的優(yōu)點(diǎn)且無(wú)需專用的設(shè)備,所以它一經(jīng)出現(xiàn)就被許多科研人員認(rèn)為是一種有可能與PCR媲美的檢測(cè)方法。
當(dāng)前常見(jiàn)的等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)有環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、鏈替代等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、滾環(huán)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、依賴解旋酶等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、依賴核酸序列等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、單引物等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)和核酸快速等溫檢測(cè)放大等技術(shù)。
和傳統(tǒng)的PCR技術(shù)相比,恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)不僅僅是縮短了核酸擴(kuò)增的時(shí)間,更重要的是核酸擴(kuò)增擺脫了對(duì)硬件的束縛。PCR技術(shù)原理是利用94℃高溫使DNA雙鏈解開(kāi),并在耐高溫的DNA聚合酶的作用下擴(kuò)增DNA片段。PCR反應(yīng)至少需要2個(gè)不同的溫度使DNA片段得到特異性的擴(kuò)增。恒溫?cái)U(kuò)增是利用各種酶與DNA之間的反應(yīng)使核酸在同一溫度下得到擴(kuò)增。同時(shí)由于恒溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)對(duì)擴(kuò)增抑制劑的耐受性大大降低了對(duì)DNA模板的純化的需求。這些都是恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)在分子診斷領(lǐng)域迅猛發(fā)展的必要因素。
在未來(lái)我們期待通過(guò)更多科研工作者的不斷努力,恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)可以像PCR一樣具備引物設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單,可以進(jìn)行多重檢測(cè)。而且也期待更多以恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)為基石診斷試劑盒不斷被開(kāi)發(fā)出來(lái)。